Co spektrofotometr naprawdę mierzy

Wbrew pozorom aparat nie mierzy stężenia. Mierzy, ile światła przeszło przez próbkę — czyli transmitancję, stosunek natężenia światła za próbką do natężenia zmierzonego dla odnośnika.
Punkt odniesienia wyznacza ślepa próba — ten sam roztwór, który wstawia się przy zerowaniu, zawierający wszystko oprócz oznaczanej substancji: rozpuszczalnik, bufor, odczynniki barwiące. Zerowanie na tej próbie eliminuje wpływ kuwety, rozpuszczalnika i strat w układzie optycznym z ostatecznego wyniku.
