Fiolka to najtańszy element analizy chromatograficznej, a potrafi zmienić wynik całej serii. Większość problemów nie wynika z jakości fiolki, tylko ze sposobu jej użycia. Poniżej opisujemy pięć błędów, które łatwo wyeliminować, i to, jak robić to dobrze. Całość pokazujemy też w krótkim filmie.

1. Źle napełniona fiolka

Fiolkę o pojemności 2 ml napełnia się do około 1,5 ml. Wolna przestrzeń nad cieczą pozwala wyrównać ciśnienie, gdy igła autosamplera przebija septę. Przepełniona fiolka może wypchnąć próbkę na septę i igłę, co grozi zanieczyszczeniem i przenoszeniem próbki między wstrzyknięciami.

Jak robić dobrze: napełniaj do ok. 1,5 ml. Gdy próbki jest bardzo mało, nie dolewaj, tylko użyj wkładki (insertu). Wkładka stożkowa pozwala pobrać próbkę niemal do końca, a płaskodenna mieści więcej cieczy.

2. Nakrętka dokręcona na siłę

Zbyt mocno ściśnięta septa odkształca się: wybrzusza albo zapada. Igła łatwiej wycina wtedy z niej drobne fragmenty, które mogą trafić do próbki i układu, a uszczelnienie wcale nie jest lepsze.

Jak robić dobrze: dokręcaj nakrętkę do wyczuwalnego oporu i na tym koniec. Po zakręceniu septa ma leżeć płasko.

3. Septa nacinana przy lotnych rozpuszczalnikach

Septa nacinana (pre-slit) ułatwia pracę igle i zapobiega powstawaniu podciśnienia w fiolce, ale nie zamyka jej tak szczelnie jak septa pełna. Firma Waters sprawdziła to na acetonie w temperaturze 20 °C: w ciągu trzech dni z fiolki z septą pełną odparowało około 0,2% rozpuszczalnika, a z fiolki z septą nacinaną około 2,2%.

Jak robić dobrze: do lotnych próbek wybieraj septę bez nacięcia. Nacinana dobrze sprawdza się przy próbkach nielotnych.

4. Wiele wkłuć w jedną septę

Warstwa PTFE od strony próbki chroni ją przed kontaktem z silikonem tylko do pierwszego wkłucia. Po przebiciu rozpuszczalnik styka się z silikonem, a każde kolejne wkłucie zwiększa ryzyko zanieczyszczeń. W przykładzie opisanym przez magazyn LCGC International (chromatografia gazowa) po pięciu wstrzyknięciach z tej samej fiolki piki pochodzące z septy były niemal tak duże jak piki analitu.

Jak robić dobrze: jeśli z jednej próbki robisz wiele wstrzyknięć, rozdziel ją na kilka fiolek.

5. Oszczędzanie na myciu i ponownym użyciu fiolek

Agilent zwraca uwagę, że mycie fiolek z użyciem ultradźwięków powoduje mikrościeranie powierzchni szkła, co zwiększa ryzyko jego pęknięcia. Nakrętki i septy po pierwszym użyciu nie gwarantują już powtarzalnej szczelności, bo każde wkłucie igły pogarsza ich parametry.

Jak robić dobrze: traktuj fiolkę, nakrętkę i septę jako materiał jednorazowy. Koszt nowej fiolki jest znikomy w porównaniu z kosztem powtórzonej analizy.

Lista kontrolna

• Napełniaj fiolkę 2 ml do ok. 1,5 ml, przy małej ilości próbki użyj wkładki.
• Dokręcaj nakrętkę z wyczuciem, septa ma leżeć płasko.
• Do lotnych rozpuszczalników wybieraj septę bez nacięcia.
• Przy długich seriach rozdziel próbkę na kilka fiolek.
• Zawsze używaj nowej fiolki, nakrętki i septy.

Fiolki, nakrętki, septy i wkładki BIOSENS

W ofercie BIOSENS znajdziesz fiolki ND9 z gwintem 9-425 wraz z nakrętkami z septą pełną i nacinaną, a także wkładki do fiolek. Najczęściej wybierane są zestawy fiolka + nakrętka, a każda partia ma certyfikat jakości.

• Zestaw: fiolka ND9 2 ml + nakrętka z septą PTFE/silikon
• Nakrętki ND9 z septą nacinaną
• Wkładki do fiolek